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細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，起到了細(xì)胞保種的作用。

 

細(xì)胞凍存技術(shù)作為一種保存細(xì)胞的有效方法，在生物學(xué)領(lǐng)域已有深入廣泛的應(yīng)用。因?yàn)檎Ｇ闆r下，直接冷凍細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生冰晶對(duì)細(xì)胞造成傷害，從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。所以需要通過(guò)添加冷凍保護(hù)劑配制細(xì)胞凍存液，來(lái)保護(hù)細(xì)胞。

 

常用的細(xì)胞凍存液通常為胎牛血清中添加10％二甲基亞砜(DMSO)，二甲基亞砜(DMSO)，可以減少冰晶的形成，減輕自由基對(duì)細(xì)胞損害，改變生物膜對(duì)電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性，可以很好地在細(xì)胞凍存過(guò)程中保護(hù)細(xì)胞。

 

操作使用：

 

1、按照常用方法懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞收集于離心管中。

 

2、1000rpm-1500rpm，5min離心，棄上清液。

 

3、加入適量的Serum-Free細(xì)胞凍存液于離心管中，推薦細(xì)胞凍存濃度為 1×106 - 1×107 cells/ml。緩慢混合均勻，制成細(xì)胞懸液。

 

4、將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示*的冷凍保存管中。

 

5、直接將凍存細(xì)胞放入-80℃冰箱，24h后轉(zhuǎn)入移至-196℃液氮罐長(zhǎng)期冷凍保存。